液相色譜分析中等度和梯度的區(qū)別？

更新時間：2024-11-05

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在液相色譜分析洗脫，分為等度洗脫和梯度洗脫

等度：流動相組成不變通常適用于單一組分或簡單組分混合物的分離，如藥物主成分含量測定;

梯度：流動相比例隨時間變化通常適用于復(fù)雜組分混合物的分離，如藥物雜質(zhì)分析。

等度和梯度的優(yōu)缺點(diǎn)？

等度洗脫：

優(yōu)點(diǎn)：流速不發(fā)生變化，壓力穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

缺點(diǎn)：多組分檢測或有雜質(zhì)干擾情況下分離度可能會差，而且不容易優(yōu)化，對于某些復(fù)雜樣品分析時間長，峰形差。

梯度洗脫

優(yōu)點(diǎn)：

a. 多組分檢測或有雜質(zhì)干擾情況下提高分離能力

b. 縮短某些復(fù)雜樣品的分析時間

c. 改善峰形，減少拖尾

d. 提高柱效，增加檢測靈敏度

缺點(diǎn)：

a. 梯度洗脫方法運(yùn)行后都需要重新平衡液相色譜柱，耗時較長

b. 由于不同的液相色譜儀存在不同的體積滯后，所以梯度洗脫方法在不同儀器間轉(zhuǎn)移時可能會出現(xiàn)分離結(jié)果的差異

c. 流速變化得由程序控制，有時會出錯

d. 壓力可能會不穩(wěn)定

e. 混合時可能會產(chǎn)生氣泡，影響基線噪聲及漂移

f. 高壓混合時可能會產(chǎn)生熱量

g. 對混合器要求很高，如果混合不好，基線噪聲和漂移會很大

h. 由于流動相比例發(fā)生變化，基線可能會漂移

i. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性沒有等度高

j. 故障率高于等度

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